Среда МРС-авторская жидкая предназначена для выделения из исследуемого материала и культивирования Lactobacillus spp.
Форма выпуска
Среда МРС-авторская жидкая выпускается в герметично укупоренных флаконах по 200 и 400 мл.
Приготовление среды
В асептических условиях вскрыть флакон и заменить резиновую пробку на ватно-марлевую. Расплавить среду на водяной бане (не кипятить!), охладить до 45 °C и разлить в стерильные чашки Петри, как указано далее.
Техника исследования
Исследуемый материал размешивают или растворяют в определенном количестве (в зависимости от требуемого разведения) растворителя (например, разведенный дистиллированной водой в 4 раза раствор Рингера). По 1 мл взвеси исследуемого материала вносят в стерильные чашки Петри, добавляют по 10 мл на чашку расплавленный и остуженный до 45 °C агар, тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Когда среда остынет, на ее поверхность наливают еще один слой (10 мл) МРС агара, не содержащего исследуемый материал, для образования «слоеной» чашки.
Инкубируют 3 суток при температуре 37 °C или 5 суток при 30 °C и учитывают результат. Оптимальные условия инкубации — в 5 % С02 (эксикатор со свечой).
Условия и срок хранения
Хранить в прохладном, защищённом от света месте.
Срок годности — 6 месяцев.
Как приготовить
В 200 мл воды очищенной последовательно растворяют:
- марганец сернокислый — 0,05 г;
- цистеин солянокислый или L-цистин — 0,10 г;
- магний сернокислый — 0,200 г;
- калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный — 2,00 г;
- аммония цитрат — 2,00 г;
- натрия ацетат (натрий уксуснокислый) — 5,00 г;
- печеночный экстракт (1:1) — 100,0 мл;
- дрожжевой аутолизат с содержанием аминного азота (0,15 ± 0,03) % — 50,0 мл;
- пептон сухой ферментативный — 10,00 г;
- гидролизат обезжиренного молока — 500,0 мл;
- полисорбат 80 — 1,00 мл;
- глюкоза — 20,00 г.
Доводят объем среды водой очищенной до 1000 мл. рН среды: (6,4 ± 0,2). Питательную среду разливают в пробирки по 10, 25 или 30 мл и стерилизуют при температуре (120 ± 2) °C в течение (15 ± 1) мин.
