Агар для идентификации листерий (ПАЛКАМ) с добавкой FD061 используют для селективного выделения и идентификации видов Listeria.
Состав**
|
Ингредиенты
|
Количество (г/л)
|
|
Пептический перевар животной ткани
|
23,00
|
|
Крахмал
|
1,00
|
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
|
D-Маннит
|
10,00
|
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,50
|
|
Эскулин
|
0,80
|
|
Глюкоза
|
0,50
|
|
Лития хлорид
|
15,00
|
|
Феноловый красный
|
0,08
|
|
Агар-агар
|
13,00
|
|
Конечное значение рН (при 25 °С) 7,0 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам.
Культуральные свойства
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35 °C:
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Характеристика колоний
|
|
Listeria monocytogenes (19118)
|
Обильный
|
Серо-зеленые с темным центром и темным ореолом
|
|
Staphylococcus aureus(25923)
|
Слабый
|
Желтые с желтым ореолом
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Слабый
|
Серые с коричнево-зеленым ореолом
|
Приготовление
Размешать 69,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121 °С) в течение 15 мин. Остудить до 50 °C и асептически внести растворенное в воде содержимое 2 флаконов с селективной добавкой (PALCAM) для листерий (FD061). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Предупреждение: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.
Принцип и оценка результата
Агар для идентификации листерий (PALCAM агар), также известный как Полимиксин (Polymyxin) – Акрифлавин (Acriflavine) – Литий (Lithium-chloride) – Цефтазидим (Ceftazidime) – Эскулин (Esculin) – Маннит (Mannitol) агар, рекомендуется для выделения листерий из пищевых продуктов.
Среда является высоко селективной ввиду наличия в ней хлорида лития, цефтазидима, полимиксина В и акрифлавина. PALCAM агар – дифференциально-диагностическая среда, в которой используются 2 индикаторные системы: с эскулином и маннитом.
Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Листерии не ферментируют маннит, поэтому сбраживающие маннит энтерококки и стафилококки формируют цветные колонии (от красного до желтого). Микроаэрофильные условия ограничивают рост аэробов, подобных представителям родов Bacillus и Pseudomonas.
Введение в состав среды яичного желтка (2,5 %) способствует восстановлению поврежденных клеток. Добавление среды с кровью поверх PALCAM агара позволяет дифференцировать и подсчитать количество гемолитических листерий.
В зависимости от типа анализируемой пробы перед высевом на PALCAM агар должно быть проведено обогащение в том или ином бульоне для селективного обогащения.
Контроль качества
Внешний вид порошка: гомогенный, сыпучий, светло-розовый.
Плотность готовой среды: соответствует 1,3%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды: имеет красную окраску, прозрачна, со слегка опалесцирующей поверхностью.
Кислотность среды: при 25 °C водный раствор (6,9 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Условия и сроки хранения
Порошок хранить при температуре ниже +30 °С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8 °С.
