Этот бульон со специальной добавкой рекомендуют для селективного выделения видов Listeria из патологического материала.
Состав**
|
Ингредиенты
|
Количество (г/л)
|
|
Пептон специальный
|
23,00
|
|
Лития хлорид
|
15,00
|
|
Натрия хлорид
|
15,00
|
|
Крахмал кукурузный
|
1,00
|
|
Эскулин
|
1,00
|
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,50
|
|
Агар-агар
|
10,00
|
|
Конечное значение рН (при 25 °С) 7,0 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам.
Культуральные свойства
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35 °С:
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гидролиз эскулина
|
|
Listeria monocytogenes (19117)
|
Обильный
|
+
|
|
Listeria monocytogenes (19111)
|
Обильный
|
+
|
|
Listeria monocytogenes (19112)
|
Обильный
|
+
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Хороший
|
—
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Подавляется
|
—
|
|
Enterococcus hirae (10541)
|
Подавляется
|
—
|
|
Bacillus subtilis (6633)
|
Подавляется
|
—
|
Приготовление
Размешать 27,75 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121 °С) в течение 15 мин. Остудить до 50 °C и асептически добавить растворенное в 50%-ном этаноле содержимое флакона с селективной добавкой для выделения листерий (FD071). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Предупреждение: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.
Принцип и оценка результата
Данная среда предназначена для выделения Listeria monocytogenes из клинических образцов и образцов пищевых продуктов.
Хлорид лития и антибиотики подавляют рост грамотрицательной микрофлоры и подавляющей части грамположительной флоры (отдельные штаммы Staphylococcus образуют эскулинотрицательные колонии). Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний.
Методика выделения листерий зависит от вида исследуемого материала. Для всех образцов рекомендуется селективное и холодовое обогащение. Фекалии и другие биоматериалы гомогенизируют в 0,1%-ной пептонной воде (M028), 0,1 мл полученной взвеси высевают на Оксфордский агар или в бульон для селективного обогащения листерий, инкубируют при 30 °C в течение 7 дней, после чего высевают на селективную среду.
Для образцов пищевых продуктов и проб из внешней среды обычно используют селективное обогащение.
Контроль качества
Внешний вид порошка: гомогенный, сыпучий, темно-желтый.
Плотность готовой среды: соответствует 1,0%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды: темно-янтарная окраска с голубым отблеском.
Кислотность среды: при 25 °C водный раствор (5,55 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Условия и сроки хранения
Порошок хранить при температуре ниже +25 °C. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8 °С.
